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產(chǎn)品選擇指南

技術(shù)服務(wù)信息

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cDNA文庫cDNA Library,Human Heart
品牌 Code No. 產(chǎn)品名稱 包裝量 價格（元） 說明書 數(shù)量
Takara 9504 cDNA Library,Human Heart 5 μg ￥6,188
 
□ 濃度  
     200 μg/ml  
□ 貯存溶液  
     Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM
     EDTA 1 mM
 
■ 制品說明
本系列制品是基于Gubler and Hoffman方法 (Gene 25:263-269、(1983))， 由各種Poly(A)+ RNA制作的質(zhì)粒DNA型cDNA文庫。合成cDNA片段時，使用了含有限制酶Not I位點的Oligo (dT)18 Linker Primer和BamH I (Bgl II)-Sma I 接頭，通過這兩個限制酶位點，使cDNA片段定向克隆到載體中?？寺∏?，做了短片段的分離處理，300 bp以下的片段大部分被去除掉。初級文庫構(gòu)建完成后，采用了固體平板培養(yǎng)法，僅對初級文庫進行一次擴增，然后使用質(zhì)粒提取試劑盒，從擴增文庫的菌體中提取質(zhì)粒，調(diào)整得到擴增的質(zhì)粒cDNA文庫。使用這種方法得到的擴增文庫，盡可能保持了各種cDNA片段的克隆在初級文庫中所占的比例。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ cDNA文庫使用的載體和多克隆位點
本cDNA文庫制品使用的載體為pAP3neo，含有SV40啟動子，可以在哺乳動物細胞中進行表達。同時，該載體含有ssDNA生成的必要f1 ori、也含有便于RNA合成的T7及T3 RNA聚合酶啟動子。
GenBank Accession No.AB003468
1. cDNA片段克隆在pAP3neo載體的Bgl II位點和Not I位點之間。
* 由于cDNA片段合成時，使用了BamH I (Bgl II)-Sma I接頭，克隆后，載體的Bgl II 位點失效，不能再被Bgl II酶切開。
2. Xba I 位點受dam methylase的影響。
 
■ 用途
對未知或已知的cDNA進行PCR篩選。
 
■ pAP3neo載體結(jié)構(gòu)圖
 

頁面更新：2024-04-01 16:29:56