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文庫構(gòu)建 |
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預(yù)制文庫 |
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■ 制品說明 |
Mate & Plate的優(yōu)點(diǎn) |
如果不使用Clontech的預(yù)制Mate & Plate Libraries,構(gòu)建和篩選一個(gè)傳統(tǒng)的酵母雙雜交文庫是非常繁冗的。而使用預(yù)制文庫,只需將MATα型文庫菌株和轉(zhuǎn)入誘餌基因構(gòu)建體的MATa型酵母菌株共同過夜孵育,然后將接合后的菌液涂板于合適的選擇培養(yǎng)基上即可,操作簡便。Clontech提供多種組織特異的、均一化的通用文庫,適用于絕大多數(shù)文庫篩選。 |
需要自己的文庫嗎?您可以自己制作,簡便而且快速。 |
如果Mate & Plate Libraries中沒有適合您需要的文庫,您可使用Make Your Own Mate & Plate Library System自己制作文庫。利用該系統(tǒng),一周之內(nèi)即可構(gòu)建足夠用于數(shù)百次酵母雙雜交篩選實(shí)驗(yàn)的所需文庫。文庫構(gòu)建是在Y187文庫酵母菌株中通過酵母高效的同源重組機(jī)制直接完成的 (圖1),無需傳統(tǒng)文庫構(gòu)建過程中的一些繁冗的操作 (比如文庫克隆、擴(kuò)增和大腸桿菌收集等)。 |
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經(jīng)濟(jì)有效的操作以及SMART技術(shù) |
該系統(tǒng)利用Clontech的SMART cDNA合成技術(shù),使用任意組織來源的少至100ng的總RNA,即可構(gòu)建cDNA文庫。SMART技術(shù)利用了MMLV (Moloney murine leukemia virus) RT的末端轉(zhuǎn)移酶活性和模板轉(zhuǎn)換機(jī)制,合成的一鏈cDNA序列末端含有已知的通用引物結(jié)合位點(diǎn)。因此,SMART一鏈cDNA可以通過PCR進(jìn)行擴(kuò)增,然后與具有末端同源序列的Matchmaker Gold 獵物載體pGADT7-Rec進(jìn)行重組?;谝陨咸卣?,使用納克級(jí)的RNA (例如來源于顯微解剖組織、激光捕獲細(xì)胞或者活檢樣品) 即可合成cDNA,共轉(zhuǎn)化這些cDNA和pGADT7-Rec到酵母菌株Y187中,即可直接構(gòu)建文庫。 |
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■ 制品特點(diǎn) |
1. 利用SMART™技術(shù)在酵母中直接構(gòu)建文庫
2.
無需繁瑣的克隆或文庫擴(kuò)增
3. 足夠用于數(shù)百次的雙雜交篩選 |
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產(chǎn)品詳情請(qǐng)點(diǎn)擊: |
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