| 磷蛋白富集試劑盒 | ||||||
| 品牌 | Code No. | 產品名稱 | 包裝量 | 價格（元） | 說明書 | 數(shù)量 |
| Clontech | 635624 | Phosphoprotein Enrichment Kit(庫存銷售完畢即終賣) | 6 Preps | ￥4,559 |
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| Clontech | 635666 | Phosphoprotein Enrichment Starter Kit | 1 Purification | ￥1,023 |
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| Clontech | 635626 | Phosphoprotein Kit-Buffer A(庫存銷售完畢即終賣) | 500 ml | ￥2,323 |
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| ■ 產品描述 | |||||||||
| 本制品基于親和原理，為從哺乳動物細胞和組織中提取磷酸化蛋白質提供了有效方法。富集試劑盒中包含了一整套的buffer和6個高結合力的柱子，用于富集胞質中和膜結合的磷酸化蛋白質，無需考慮例如絲氨酸、酪氨酸或蘇氨酸等的氨基酸修飾。 | |||||||||
| 這種富集方法的優(yōu)勢： | |||||||||
| · 實驗操作快速，從細胞到樣品純化的平均時間少于2 h。 · 操作簡單直接，包括4步，將提取/上樣buffer加到細胞或組織沉淀中來提取細胞總蛋白質， 然后將提取產物加到親和純化柱上，洗滌，最后使用不含清潔劑的Elution Buffer將結合的磷酸化 蛋白質洗脫下來。 |
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| · 一種Buffer多個用途，Extraction/Loading Buffer可以用于蛋白質提取和純化步驟， 而不需要更換緩沖液，這樣便節(jié)省了時間也防止樣品丟失。 · 實驗過程是非變性的，所以整個過程中磷酸化蛋白質是保持折疊構象的，包括提取和洗脫的步驟。 |
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| 每個純化柱的最大結合能力約為4 mg磷酸化蛋白質。 | |||||||||
| 高選擇性富集磷酸化蛋白質 | |||||||||
| 本富集試劑盒可以用于任何類型的哺乳動物細胞。已做過測試的細胞系包括NIH 3T3，HEK 293，HeLa，Cos-7和Jurkat細胞。富集效率很高，已經過Western Blotting分析證實。通過使用磷酸鹽比色檢測法，可以發(fā)現(xiàn)大部分的磷酸化蛋白質都在洗脫液中，在洗滌步驟的組分中只檢測到痕量，可以忽略。 使用本試劑盒得到的磷酸化蛋白質是濃縮液，可以使用多種不同的方法進行分析，包括質譜、二維聚丙烯酰胺凝膠電泳（2D-PAGE）等。 |
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| ■ 特點 | |||||||||
| · 非變性條件下操作，可保持蛋白質的構象和溶解性 · 適用于質譜和2D-PAGE等多種下游應用 · 提高磷酸化檢測實驗的靈敏度 |
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| ■ 應用 | |||||||||
| · 質譜樣品制備 · 磷酸化分析 · 2D-PAGE樣品制備 |
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| ■ 實驗例 | |||||||||
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| 使用本制品可以高效富集磷酸化蛋白質。提取HEK 293細胞的總蛋白質，取大約3 mg加入到本制品提供的磷酸化蛋白質親和純化柱上。Lane1是提取產物，Lane2是流穿液，Lane3是洗滌組分，Lane4是洗脫組分，然后分別使用特異性結合磷酸化AKT、PTEN和GSK3β蛋白質的抗體經Western Blotting檢測，結果分別如圖A、B、C所示，可以看出在洗脫液部分清晰地檢測到了磷酸化蛋白質。請注意，樣品在凝膠上樣之前沒有被稀釋或濃縮。 | |||||||||
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頁面更新：2019-11-12 10:55:07
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