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核小體制備試劑盒EpiScope^® Nucleosome Preparation Kit
品牌	Code No.	產(chǎn)品名稱	包裝量	價(jià)格（元）	說明書	數(shù)量
Takara	5333	EpiScope^® Nucleosome Preparation Kit	50 Rxns	￥3,384

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■ 制品內(nèi)容 (50 次量)

Package 1
Micrococcal Nuclease (20 U/μl)	50 μl
Micrococcal Nuclease Buffer (10X)	1 ml
RNase A (20 mg/ml)	100 μl
0.5 M EDTA	100 μl
Proteinase K	200 μl
LINE-1 qPCR Primer (10 μM each)^*	50 μl

Package 2
Cytoplasmic Lysis Buffer	25 ml×2
Protease Inhibitor Cocktail (100X)	550 μl

* 使用Real Time PCR進(jìn)行相對(duì)定量解析時(shí)，作為校正基因組DNA量的參考來使用。因?yàn)槭侨嘶蚪MDNA檢出用引物，不可用于其他物種的檢測(cè)。

■ 制品說明

真核生物細(xì)胞的細(xì)胞核中存在的核小體 (nucleosome) 是染色質(zhì)的基本構(gòu)成單位，它是由組蛋白為核心和纏繞于組蛋白的基因組DNA共同組成的。目前我們已經(jīng)知道基因組DNA上的核小體DNA是以一定的間隔存在的，它的存在位置與染色質(zhì)構(gòu)造及轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制有著密切關(guān)系，因此在基因表達(dá)調(diào)控研究中的重要領(lǐng)域--表觀遺傳學(xué)研究中，核小體作為重要的研究對(duì)象之一。具有轉(zhuǎn)錄活性的基因其啟動(dòng)子區(qū)域中不存在核小體，一直處于轉(zhuǎn)錄起始時(shí)可與必要的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合的狀態(tài)。一旦該區(qū)域的DNA發(fā)生甲基化，此部位就會(huì)形成核小體，轉(zhuǎn)錄因子不能與啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合使轉(zhuǎn)錄受到抑制。
本制品是從動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞中制備核小體的專用試劑盒。從制備的核小體提取DNA后，利用Real Time PCR及高速測(cè)序可以解析核小體在基因組上的位置。
本制品的操作流程如下：
1. 細(xì)胞的溶解與細(xì)胞核的離心沉降。
2. Micrococcal Nuclease切斷未纏繞在組蛋白上的DNA。
3. Proteinase K處理去除組蛋白。
4. DNA的回收 (需要另備DNA純化試劑盒，如Clontech Code No. 740609.10/.50/.250)
使用本制品回收的DNA為已形成核小體的基因組DNA區(qū)域，未纏繞于組蛋白上的基因組DNA已被Micrococcal Nuclease切斷。
[注意] 本試劑盒不適用于經(jīng)EpiScope ChIP Kit (anti-mouse IgG)(Code No.:5331) 等交聯(lián)處理后細(xì)胞的染色質(zhì)片段使用。

■ 保存

Package 1：-20℃
Package 2：4℃。

■ 注意事項(xiàng)

1. 酶類試劑使用前請(qǐng)輕微離心，然后置于冰上。
2. Protease Inhibitor Cocktail、Micrococcal Nuclease Buffer (10X) 和0.5 M EDTA使用前在室溫下融解，混勻后離心，在室溫下使用。使用后于各溫度保存。
3. 室溫下配制Micrococcal Nuclease反應(yīng)液混合液，配制混合液時(shí)最后添加Micrococcal Nuclease。 (冰上配制會(huì)出現(xiàn)鹽析，出現(xiàn)鹽析時(shí)請(qǐng)于37℃融解。)

頁面更新：2024-02-29 11:51:43

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