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■ 制品說(shuō)明 | ||||||||||||||||
按需(on-demand)報(bào)告載體是下一代啟動(dòng)子報(bào)告系統(tǒng)。使用此報(bào)告系統(tǒng),可以在不影響實(shí)驗(yàn)信號(hào)強(qiáng)度的前提下,有效地降低報(bào)告基因的背景,使低背景和強(qiáng)信號(hào)不再相互排斥。 | ||||||||||||||||
傳統(tǒng)的啟動(dòng)子報(bào)告分析通常面臨這樣一個(gè)問(wèn)題,即大多數(shù)啟動(dòng)子并不是很“嚴(yán)格”,甚至可以在沒(méi)有被激活的情況下驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因表達(dá)。例如,在轉(zhuǎn)染和實(shí)驗(yàn)開(kāi)始之間的時(shí)間內(nèi),這些預(yù)先存在的報(bào)告分子(背景)是實(shí)際實(shí)驗(yàn)中啟動(dòng)子誘導(dǎo)后低信噪比的主要原因。 | ||||||||||||||||
以往解決這個(gè)問(wèn)題的方法是對(duì)報(bào)告基因進(jìn)行修飾,使其可以快速降解。然而,由于這些報(bào)告分子一經(jīng)產(chǎn)生隨即降解,即使啟動(dòng)子被激活,也不可能在細(xì)胞內(nèi)大量積累。因此,只有一小部分報(bào)告分子存在足夠長(zhǎng)的時(shí)間以進(jìn)行檢測(cè),并且這種類(lèi)型的分析具有較低的信號(hào)強(qiáng)度。 | ||||||||||||||||
On-Demand Living Colors Fluorescent Protein Reporter Systems可以有效解決上述問(wèn)題,該系統(tǒng)結(jié)合應(yīng)用了以下兩種技術(shù):每個(gè)系統(tǒng)中包含一個(gè)明亮的熒光蛋白質(zhì)(AmCyan1、tdTomato或 ZsGreen1)作為報(bào)告蛋白質(zhì),具有高信號(hào)強(qiáng)度;結(jié)合配體依賴(lài)性的ProteoTuner蛋白質(zhì)穩(wěn)定/去穩(wěn)定技術(shù),以消除背景。 | ||||||||||||||||
在這些系統(tǒng)中,熒光蛋白質(zhì)報(bào)告基因以融合蛋白質(zhì)的形式表達(dá),其N(xiāo)端連接配體依賴(lài)性去穩(wěn)定結(jié)構(gòu)域(destabilization domain, DD)。DD可以快速地針對(duì)報(bào)告蛋白質(zhì)進(jìn)行蛋白酶體降解,以保證實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)的低背景信號(hào)。隨后,當(dāng)具有膜通透性的小分子配體Shield1被添加到樣本中時(shí),它會(huì)與DD結(jié)合,并保護(hù)報(bào)告蛋白質(zhì)不被降解,從而使報(bào)告蛋白質(zhì)積累到可檢測(cè)水平。 | ||||||||||||||||
當(dāng)報(bào)告蛋白質(zhì)被啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)時(shí),通過(guò)同時(shí)添加Shield1與候選誘導(dǎo)劑,可以有效地穩(wěn)定報(bào)告蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。與其他類(lèi)型的報(bào)告系統(tǒng)相比,該系統(tǒng)可以使啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)大多數(shù)熒光蛋白質(zhì)報(bào)告分子,允許在一個(gè)比較高的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),且顯著改善了信噪比,從而有利于信號(hào)的檢出。 | ||||||||||||||||
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■ 制品特點(diǎn) | ||||||||||||||||
1. 高信噪比 2. 強(qiáng)信號(hào) 3. 易于監(jiān)測(cè)(可選擇red、green和cyan熒光蛋白質(zhì)報(bào)告系統(tǒng)) 4. 選擇靈活,可將任何感興趣的啟動(dòng)子插入DD熒光報(bào)告蛋白質(zhì)的上游。 5. 有質(zhì)粒載體和慢病毒載體可供選擇 |
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■ 保存 | ||||||||||||||||
-20℃ | ||||||||||||||||
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頁(yè)面更新:2020-12-28 16:00:35