當(dāng)載體與插入的DNA片段的總長度小于5 kb時,使用本試劑盒較為合適;如果載體與插入DNA片段長度太長時,不推薦使用本試劑盒。
PCR反應(yīng)后的DNA片段應(yīng)進(jìn)行切膠回收純化,然后再進(jìn)行自身連接反應(yīng),這樣可以提高突變成功率。
Ligation Solution I請于冰中融解,使用前混勻。應(yīng)避免多次反復(fù)凍融。
可以從以下兩方面進(jìn)行改進(jìn):
1. 確認(rèn)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2. 延長連接反應(yīng)時間至過夜反應(yīng)。
頁面更新:2020-04-27 14:15:35