反應(yīng)時(shí)間和DNA產(chǎn)量 |
建議使用3'端保護(hù)性修飾的3'Phosphorothioate-modified Random Hexamer (Code No. 3807) 進(jìn)行擴(kuò)增,以防止引物被phi29 DNA Polymerase的3'-5'核酸外切酶活性降解。 |
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圖2. 反應(yīng)時(shí)間和DNA產(chǎn)量 |
使用phi29 DNA Polymerase和3’Phosphorothioate-modified Random Hexame,以pUC19質(zhì)粒DNA為模板(N=2)進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。將0.5 ng pUC19質(zhì)粒DNA加入到反應(yīng)液中,反應(yīng)條件為30℃下2、4、6、8和16 小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后,測(cè)定每個(gè)反應(yīng)的DNA產(chǎn)量。 結(jié)果顯示,即使在2小時(shí)內(nèi)也能獲得足夠的產(chǎn)量,但如果需要獲得更高的產(chǎn)量,則延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(4~16 小時(shí))。 |